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病理组织切片制作

来源:http://www.xxhl58.com/news/454.html    发布时间:2020-12-25    点击:30

  一、实验目的组织切片技术是病理学中不可缺少的一个组成部分。通过实验,能够使学生了解和掌握病理组织切片的基本方法之一,即石蜡包埋的组织切片法。

    二、实验原理根据病变及检查的要求,合理采集病料,经固定、脱水、透明、浸蜡、包埋后进行切片,在进行染色得到结论。

  一、实验目的

  组织切片技术是病理学中不可缺少的一个组成部分。通过实验,能够使学生了解和掌握病理组织切片的基本方法之一,即石蜡包埋的组织切片法。


  二、实验原理

  根据病变及检查的要求,合理采集病料,经固定、脱水、透明、浸蜡、包埋后进行切片,在进行染色得到结果。固定是用化学药品把组织原来的结构保存下来,以便观察。脱水是除去组织中的水分,以利于透明和浸蜡。组织的透明是便于透蜡包埋。包埋的是使石蜡透入组织内部,把软组织变为适当硬度的包埋块,以便切成薄片。***后使用切片机,将包埋块中组织切成薄片。

  三、主要仪器及试材

  已固定好病料,石蜡,手术刀,手术剪,镊子,脱水框,染色缸,梯度脱水酒精和透明剂一套,烘箱,切片机,毛笔,玻片,蛋白甘油,染色架,酒精灯,三角架,大烧杯,温度计,火柴,切片刀,记号笔或铅笔。

  四、实验方法与步骤。

  (一)固定

  采取的病理材料必须立即放入10%福尔马林固定液中。

  (二)脱水


  组织经固定后,尚含有多量水分,而水与透明剂苯、石蜡根本不相融合。必须先把组织中的水分除去。但脱水剂必须是与水在任何比率下均能混合的液体,脱水剂常兼有硬化组织的作用。***常用的脱水剂为酒精、丙酮等。

  1.酒精 沸点78.4℃,为***常用的脱水剂。脱水能力强,并能使组织硬化,能较好地与二甲苯透明剂相混合。***终结果表明,只要脱水环节处理好,都会得到好的切片。脱水的程序为70%一80%一95%一100%。各级酒精2—4小时,视材料的大小、厚薄而定。100%酒精有硬化组织的作用,时间不宜太长,一般不超过3小时。脑组织、脂肪组织或疏松结缔组织,脱水时间要适当延长。

  2.丙酮 沸点为56℃。脱水作用比乙醇强,但对组织块的收缩较大,主要用于快速脱水或固定兼脱水。脱水时间l一3小时左右。  

  (三)透明

  透明对组织有脱酒精及透明两种作用。当组织中全部为透明剂占有时,

  光线可以透过,组织可呈现不同程度的透明状态,此种现象称为透明,具有这种作用的试剂称为透明剂。常用的透明剂有:

  1.二甲苯 是***常用的良好透明剂,不影响各种染色。二甲苯易溶于酒精,能溶解石蜡,也是封固剂,不吸收水,透明能力强,易使组织收缩、变脆,故组织块在二甲苯中不宜久留,特别对小动物组织材料必须严格控制好(各种器官的透明差异很大),通常为半小时到1小时左右。

  当二甲苯透明时必须持组织放在专用二甲苯皿器中,这样可减少透明时间,有利于组织透明彻底,在换组织块透明时候,所用的镊子等器具必须干燥,不得将水滴混入二甲苯中,因水滴易被组织吸收而影响透明程度,潮湿天气更应引起注意。

  2.冬青油(水杨酸甲酯)为无色油样液体,易溶于醇、醚及冰醋酸,难溶于水。透明速度较慢,数小时或数天。一般经无水乙醇脱水后再入冬青油。

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